ICS 65.120 B 46 备案号： 内 DB15 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1075—2016 饲用液体香味剂中挥发性风味物质的测定 SPME-GC-MS 法 Determination of Volatile Flavor Compounds in the Feed Liquid Flavor Agent SPME-GC-MS Method 2016-12-05 发布 内蒙古自治区质量技术监督局 2017-03-05 实施 发 布 DB15/T 1075—2016 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语与定义 ........................................................................ 1 4 试剂和材料 ........................................................................ 1 5 仪器和设备 ........................................................................ 1 6 测定步骤 .......................................................................... 2 7 结果计算 .......................................................................... 3 8 精密度 ............................................................................ 3 附录 A（资料性附录） 固相微萃取实验装置简图 .......................................... 4 附录 B（资料性附录） 饲用液体香味剂中挥发性风味物质总离子色谱图 ...................... 5 I DB15/T 1075—2016 前 言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本标准由内蒙古自治区农牧业厅归口。 本标准起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院动物营养与饲料研究所。 本标准主要起草人员：马燕芬、高民、卢德勋、赵军、羿静、王丽芳。 II DB15/T 1075—2016 饲用液体香味剂中挥发性风味物质的测定 SPME-GC-MS 法 1 范围 本标准规定了饲用液体香味剂中挥发性风味物质成分的测定方法。 本方法适用于饲用液体香味剂中乙酸异戊酯、丁酸异戊酯、沉香醇、丙酸苄酯、丁香酚的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格为一级水。 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 饲用香味剂 用以改善、增加和模仿食品的香气和香味为主要目的的动物用添加剂。 4 试剂和材料 除非另有说明，在分析中应使用分析纯试剂。水为GB/T 6682规定的一级水。 4.1 甲醇 色谱纯 4.2 氯化钠 4.3 丁酸甲酯 内标物质，含量大于99.0%。 4.4 内标物质浓度配制方法：准确称取丁酸甲酯（4.3）原液0.5 mg于100 mL容量瓶中，用甲醇（4.1） 定容至100 mL，此为内标原液。取1.0 mL内标原液和4.0 mL无水甲醇于100 mL容量瓶中，用重蒸水稀释 至100.0 mL(0.05 μg/mL)。 4.5 非极性萃取纤维头：使用前需先将涂层为非极性聚二甲基硅氧烷（厚100 μm）的新PDMS萃取纤维头 在气相色谱进样口250 ℃，载气流速为1 mL/min条件下老化60 min。旧PDMS萃取纤维头在使用前需在气 相色谱进样口250 ℃，载气流速为1 mL/min条件下老化20 min。 5 仪器和设备 5.1 气相色谱质谱仪器，配 EI 源 5.2 固相微萃取装置 1 DB15/T 1075—2016 6 测定步骤 6.1 样品的提取 量取 8 mL 饲用液体香味剂放入 15 mL 顶空瓶（带有密封垫）中，加入 2.56 g 氯化钠（4.2），加入 1 mL 内标溶液（4.4） ，在 40 ℃水浴中预热 20 min，然后将带有 PDMS 纤维头的 SPME 插入顶空瓶中， 用固相微萃取装置在 40 ℃下萃取 30 min（注意不要让萃取头接触溶液，避免污染萃取头） 。 6.2 测定 6.2.1 气相色谱条件 6.2.1.1 6.2.1.2 min 6.2.1.3 6.2.1.4 6.2.1.5 6.2.1.6 6.2.1.7 6.2.2 气相色谱柱：毛细管柱色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm） 色谱柱升温程序：起始温度 40 ℃，保留 2.5 min，以 10 ℃/min 上升到 200 ℃，保留 2 进样口温度：250 ℃ 检测器温度：250 ℃ 载气：高纯氦气 载气流速：1 mL/min 气相色谱仪进样口热解吸时间：5 min～10 min。 质谱条件 6.2.2.1 6.2.2.2 6.2.2.3 6.2.2.4 6.2.2.5 6.2.2.6 6.2.2.7 6.2.2.8 电离方式:EI 电离电压：70 eV 恒压：10 psi 离子源温度：200 ℃ 进样口温度 260 ℃ 灯丝电流：0.25 mA 电子倍增器电压：1500 V 扫描范围：35 μ －450 μ 6.3 定性测定 在上述设定的条件下，将SPME萃取头放入气相色谱进样口进行热解析测定，采用系统自备NIST数 据库进行质谱检索，相似度高于99 %的挥发性风味物质进行定性。 6.4 定量测定 在上述设定的条件下，将SPME萃取头放入气相色谱进样口进行热解析测定，采用内标面积归一化 法进行相对定量。 6.5 平行试验 按上述步骤对同一试样进行平行测定。 2 DB15/T 1075—2016 7 结果计算 试样中乙酸异戊酯、丁酸异戊酯、沉香醇、丙酸苄酯、丁香酚的百分含量按式（1）式计算，平行 测定结果用算术平均值表示，保留两位有效数字： Ai × fi × Ms Wi % = ------------------------- × 100% ‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥（1） As × fs × Mi 式中： Wi ——被测组分的百分含量，%； Ai ——被测组分的峰面积； As ——内标物的峰面积； fi ——被测组分的峰高相对校正因子； fs ——内标物的峰高相对校正因子； Mi ——加入样品的量，单位为毫克（mg）； Ms ——加入内标物的量，单位为毫克（mg）。 8 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于两个测定值的算术平均值的10﹪。 A 3 DB15/T 1075—2016 附 录 A （资料性附录） 固相微萃取实验装置简图 图A.1 SPME 萃取挥发性物质实验装置简图 图A.2 SPME 萃取挥发性物质磁力搅拌装置 4 DB15/T 1075—2016 BB 附 录 B （资料性附录） 饲用液体香味剂中挥发性风味物质总离子色谱图 图B.1 饲用液体香味剂中挥发性风味物质总离子色谱图 _________________________________ 5