ICS 65.020.20 CCS B38 重 DB50 庆 市 地 方 标 准 DB50/T 1223—2022 玄参组培快繁技术规程 2022-04-01 发布 2022-07-01 实施 重庆市市场监督管理局发 布 DB50/T 1223—2022 前  言 本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第１部分：标准化文件的结构和起草规则》的规则起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由重庆市农业农村委员会提出。 本文件由重庆市农业农村委员会归口并组织实施。 本文件起草单位：重庆市中药研究院。 本文件主要起草人：伍晓丽、陈大霞、李隆云、张雪。 I DB50/T 1223—2022 玄参组培快繁技术规程 1 范围 本文件规定了玄参组培快繁的培养环境、外植体制备、培养基配制、组培苗培养、组培苗过渡移植 等技术。 本文件适用玄参组培苗的生产。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 培养基配制 4.1 愈伤组织诱导和继代培养基 MS + 蔗糖 20 g/L + 6-BA 1 mg/L+ NAA 0.5 mg/L，pH 5.8。 4.2 芽诱导培养基 MS + 蔗糖 20 g/L + 6-BA 1 mg/L+ NAA 0.1 mg/L，pH 5.8。 4.3 根诱导培养基 1/2 MS + 蔗糖 10 g/L ，pH 5.8。 5 外植体制备 5.1 枝条采集 5～7 月，选择晴天 9:00～11:00 采集无病虫害、生长健壮的带顶芽枝条。 5.2 外植体制备 取 0.5 mm～1 mm 茎尖，用 3% 洗衣粉水浸泡 1 min，流水冲洗 40 min；洗涤后的茎尖置于灭菌 的烧杯中，在超净工作台上用 75% 乙醇洗涤 1 min，无菌水漂洗 1 次；用 1‰ 的升汞消毒 4 min， 无菌水漂洗 4 次，无菌滤纸吸干水分。 1 DB50/T 1223—2022 6 愈伤组织诱导培养 6.1 接种 在超净工作台上，将外植体浅插入愈伤组织诱导培养基上，盖封口膜，标明编号。 6.2 培养 将接种后的培养瓶摆放在培养架上，温度 25 ℃，培养 30 d～40 d 形成愈伤组织。 7 继代培养 7.1 接种 在超净工作台上，将每个愈伤组织分割成 3 份～5 份 ，接种于继代培养基上，盖封口膜，标明编 号。 7.2 培养 将接种后的培养瓶摆放在培养架上，温度 25 ℃，培养 30 d～40 d。 8 芽诱导培养 8.1 接种 将继代培养的愈伤组织接种到芽诱导培养基上，盖封口膜，标明编号。 8.2 培养 将接种后的培养瓶摆放在培养架上，温度 25 ℃，光照强度 2000 Lx，光照时间 12 h/d，培养 25 d～30 d。 9 根诱导培养 9.1 接种 将 3 cm～5 cm 长的芽接种到根诱导培养基上，盖封口膜，标明编号。 9.2 培养 将接种后的培养瓶摆放在培养架上，温度 25 ℃，光照强度 2000 Lx，光照时间为 12 h/d，培养 10 d～15 d。 10 炼苗 10.1 瓶苗炼苗 待苗高 7 cm～10 cm，根长 3 cm 以上，置于有光的自然条件下 2 d，后松开瓶盖 2 d，再半开瓶 盖 2 d，最后揭去瓶盖 3 d。 2 DB50/T 1223—2022 10.2 穴盘炼苗 10.2.1 基质 珍珠岩：河沙=1:1 混合作为基质，121 ℃高压灭菌 30 min。 10.2.2 穴盘 穴盘规格：孔径 6 cm，深度 7 cm。灭菌后的基质填充穴盘，喷淋清水润湿，待用。 10.2.3 过渡移植 将苗取出，洗净基部培养基，植入穴盘基质中。穴盘置于苗床上。 _________________________________ 3